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离子对试剂及盐类的使用和注意事项说明

点击次数:121次 发布时间:2022-03-25

   离子对试剂及盐类是一类常用的实验室试剂,将这类试剂加入到反相色谱流动相中可以增强离子样品的保留。使用其可以改善疏水键合相表面的离子交换能力,可以在温和的流动相pH条件下更好地控制酸性或碱性样品的保留。

  通过试剂上的疏水部分(常见的有庚烷基,十二烷基)与色谱柱固定相发生作用而吸附在柱床上,使固定相具有了一定的离子交换能力,从而增强对带相反电荷的分析物的保留。
 
  离子对试剂及盐类的使用:
  加入离子对的目的
  加入与待测组分相反的离子,形成弱极性离子对,增强保留,改善峰形。
 
  加入离子对的情形
  反相HPLC中不保留或保留很差;
  化合物有强离子官能团:磺酸基、羧基、氨基、铵基等。
  注意:化合物在反相流动相体系中要有足够的溶解度,能不用就不使用。使用的色谱柱专柱专用,不同离子对可以使用同一色谱柱。
 
  离子对试剂及盐类的注意事项:
  ●试剂的用量:按当量计算,浓度至少比样品浓度大4~5倍;
 
  ●磺酸类离子对不建议采用梯度洗脱;超过30%的有机相建议预混;
 
  ●有机相优先使用甲醇;建议使用进口试剂,特别是波长小于240nm时;使用容易出现鬼峰;
 
  ●温度变化对离子对色谱的影响更大;
 
  ●离子对色谱中,pH对物质保留的影响正好与普通反相色谱相反;
 
  ●经验性:加入烷基磺酸钠,碱性物质保留时间增加;中性和酸性物质保留时间减小。
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